Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1型糖尿病患者进展缓慢的过程里面逐渐扩展

从第一次显现肾脏免疫到显现1改型肝炎药理学症状的困难重重叛将在儿童时期就有不错的描绘，多个肾脏免疫相似性性的儿童中所有70%在血清转换后10年内患上肝炎，而随访15年的儿童这一数量缩减到84%。远比之下，占药理学1改型肝炎一半以上的改型1改型肝炎的肺癌机制还未获取充分的研究课题。

越来越多的人开始有别于分期系统设计来假定1改型肝炎的困难重重：有机体在显现多种肾脏免疫时转到第1阶段，显现摄入量出现异常时转到第2阶段，显现症状时转到第3阶段。一些多发肾脏免疫相似性性的有机体，在1期和2期，困难重重较比较慢，并发展为肺癌的1改型肝炎。我们之后描绘了一四组在首次验证到多种肾脏免疫取样后大概10年无肝炎的较快困难重重者，这四组病患者总人数少，但相似性非常明确。随后，我们发现肾脏免疫特异性CD8+T新线粒体催化在困难重重快速的病患者中所基本不存在，但在未来会肺癌和普遍存在的肝炎病患者中所很更容易验证到。这意味著表明，与困难重重病患者远比，这些病患者免疫催化的通气弱化。

最初研究课题表明，尽管通气性T新线粒体(Treg)数量长一段时间，但肝炎病患者存在一些特性缺陷，其中所最主要对IL-2的催化能力降低。此外，肝炎病患者中所的效应以CD4+T新线粒体意味著对通气更具抵抗性，展现为效应以T新线粒体的可抑制西移动，自然产生的Treg和体外产生的抑止Treg，以及免疫经历的CD4+T新线粒体中所IL-2催化西移动。本研究课题的用意是描绘了CD4+通气性T新线粒体(Treg)在群集总括快速困难重重者中所的相似性，他们的年长为43岁(31-72岁)，随访一段时间为18-32年。

新方法：BOX研究课题是一项以许多人为了将的两端研究课题，在21岁以下出院的病患者亲属中所检查1改型肝炎的可怕因素所。我们之后描绘了长期快速困难重重者的相似性，他们维持多重肾脏免疫相似性性最多10年，但未显现肝炎的药理学症状，比较慢性或非外阴免疫。随后，10名在此期间维持无肝炎并希望发放大量血液取样的快速困难重重者划入T和B新线粒体特性系统性。在目前的研究课题中所，8名比较慢困难重重者(SP四组)，中所位年龄43岁(31-72岁)，18 - 32岁间的肾脏免疫相似性性。所有的参加者都处于1改型肝炎困难重重的1期，尽管一些人随后挽回了肾脏免疫对某些免疫的相似性性催化，然而，一名病患者仍然处于2期大概6年，但未显现药理学症状，一名病患者被诊疗为肝炎，该受试者72岁，在采集实验取样时，其HbA1c升高到53 mmol/mol(7%)，在数据系统性中所对该酪氨酸顺利完成了实质上评质子。分离外周血单个质子新线粒体(PBMCs)，有别于多参数流式新线粒体精和T新线粒体可抑制试制评质子酪氨酸中所Treg的频叛将、表改型和特性。有别于FlowSOM和CITRUS(聚类鉴定、表征和紧接著)顺利完成无行政官员聚类系统性，评质子Treg表改型。

结果：与身体健康酪氨酸远比，来自比较慢困难重重体的梦境CD4+T新线粒体的行政官员聚类辨识，激活的梦境CD4+ Treg频叛将缩减，与糖皮质激素抑止的TNFR相关细胞内(GITR)表述缩减有关。一名HbA1c升高的病患者与困难重重快速者和也就是说的对应以四组远比，Treg谱有所完全相同。特性系统性表明，与身体健康酪氨酸远比，来自快速困难重重体的Treg激活的CD4+效应以T新线粒体可抑制厚实受损。展现为对效应以CD4+T新线粒体CD25和CD134表述的可抑制缩减。

绘出1 熟悉的表改型系统性辨识，CD4+Treg亚改型在比较慢困难重重队列中所缩减。由FlowSOM分解成的Treg室，聚集在来自所有酪氨酸的活CD4+CD45RA -新线粒体上。根据标识物表述鉴定出10个元簇:梦境T新线粒体_1;梦境T cell_2;梦境T cell_3;梦境T cell_4;CD49b梦境T新线粒体;HLA-DR + GITR +梦境T新线粒体;寄存器Treg_1;寄存器Treg_2;寄存器Treg_3;和寄存器Treg_4。(a)有别于9个完全相同Treg标识分解成的10个元簇的MST。每个路由表象征性一个战斗群(100个战斗群)，更大的元战斗群(10个元战斗群)在路由表四组周围上色。每个路由表中所的碗绘出暗示单个标识的表述评定。(b)每个元聚类的热绘出，以辨识整体标识表述。(c, d)为HD四组(c)和SP四组(d)分解成绘出，以及FlowSOM辨识的每个元簇的很薄。(e-l)比较总质量为每个metacluster木箱新1](总质量> 0.05%)相符为HD和SP四组:寄存器Treg_2 (e),寄存器Treg_3 (f),寄存器Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +梦境T新线粒体(h)、梦境T cell_1(i),梦境T cell_2 (j),梦境T cell_3 (k) n d CD49b梦境T新线粒体(l)。紫色白点象征性捐助者SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon配对符号秩检验。此键适用于绘出形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

绘出2 有别于CITRUS的预测模改型证实，Treg频叛将的缩减是困难重重快速的字样。评定门控(a - f)和柑橘系统性(g-k)比较SP参加者和也就是说的HD参加者在CD4+CD45RA−T新线粒体上的歧异。(a)互补CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l小团体的象征性性绘出。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3富集，然后通过HLA-DR和GITR表述顺利完成分离，演示FlowSOM小团体。(b) HD(白点)和SP(白点)四组以及酪氨酸SP 606(紫色)中所CD25+ cd127的频叛将概述绘出。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+门控叔父集的木箱新1];(c) HLA-DRloGITR−(寄存器Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(寄存器Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(寄存器Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+寄存器T cell)。(g - i)柑桔簇螺旋由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3表述强度着色，圆圈厚实的簇被辨识为SP和HD队列间的完全相同。(j)木箱新1]辨识了在SP(白点)和HD(灰点)四组中所，CITRUS梦境Treg_3和Treg_4的比较总质量(数量)。(k)直方绘出辨识每个簇的表改型(粉红色)和Treg标识比较表述与背景表述(浅蓝色);上列，寄存器Treg_3;下面一行，寄存器Treg_4。背景与所有其他簇中所标识的表述有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon配对符号秩检验

绘出3 与身体健康献血者远比，困难重重快速者梦境treg的GITR缩减。每个梦境CD4+T新线粒体元簇(梦境T新线粒体_1;梦境T cell_2;梦境T cell_3;CD49b +梦境T新线粒体;HLA-DR + GITR +梦境T新线粒体;寄存器Treg_2;寄存器Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)验证每个表述标识的变化。(a,b)来自HD (a)和S (b)队列的表述热绘出(sp606不最主要在内)。(c,d)梦境Treg_4元簇中所所有HD(黄色)、所有SP(浅蓝色)和SP 606(紫色)的FlowSOM GITR表述串联，辨识直方绘出(c)和概述绘出(d)。Wilcoxon配对符号秩和检验，p< 0.07(紫色)所有酪氨酸最主要，p< 0.05(浅蓝色)酪氨酸SP 606和也就是说的HD不最主要在测试中所。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs中所GITR表述，从评定门控，从所有HD(黄色)、所有SP(浅蓝色)和SP 606(紫色)串联，辨识直方绘出(e)和概述绘出(f) *p< 0.05, Wilcoxon配对符号秩检验

绘出4 来自快速困难重重的CD4+ treg新线粒体支配效应以CD4+T新线粒体的能力降低。SP四组用浅蓝色的新线和白点暗示，HD四组用蓝色的新线和白点暗示，紫色的新线/白点暗示酪氨酸sp606。有别于CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T新线粒体顺利完成分选。CD4+CD25−(反之亦然者)被标识为CFSE, Treg按判读的数量滴定。用抗CD3 /28微珠再造新线粒体，养成3翌日顺利完成流式新线粒体精验证。(a-d)与CD4+反之亦然者比较应以的treg养成(自体)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD反之亦然者养成。(a,b,f) CFSE凋亡(a,e)和CFSE可抑制百分比(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的可抑制百分比。有别于相似性性对应以(激活的响应以新线粒体不含treg)计算可抑制百分比。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差系统性。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

绘出5 效应以CD4+T新线粒体对快速困难重重的T新线粒体再造的可抑制更敏感。SP四组用浅蓝色的新线和白点暗示，HD四组用蓝色的新线和白点暗示，紫色的新线/白点暗示酪氨酸sp606。有别于CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T新线粒体顺利完成分选。CD4+CD25−(反之亦然者)被cfsel标识，treg按判读的数量滴定。用抗CD3 /28微珠再造新线粒体，养成3翌日顺利完成流式新线粒体精(CD25反染)和新线粒体因叔父系统性。HD Treg与HD、SP或sp606反之亦然者共同养成。(a,b) CFSE凋亡(a)和CFSE可抑制百分叛将(b)。(c,d) CD25可抑制百分叛将(c)和CD134可抑制百分叛将(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共养成中所的表述。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差系统性。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

论点：我们得出结论的论点是，来自快速困难重重叔父的再造梦境CD4+Treg在GITR表述中所获取了拓展和丰富，合理化了进一步研究课题Treg在1改型肝炎可能会有机体中所的异质性的必要性。

出处出处：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28